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核酸分离提取
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5个问题让你彻底了解磁珠法全血DNA提取试剂盒
2014-03-25 11:18   查看  
    磁珠法全血DNA提取试剂盒采用特殊包被的生物磁珠,通过独特分离作用的缓冲液系统,从全血中分离纯化高质量核酸。磁珠在一定条件下对目的核酸具有很强的亲和力,当条件改变时,磁珠释放吸附的核酸,能够达到快速分离纯化核酸的目的。整个过程不涉及有毒试剂,操作环境更加便利,提取的核酸纯度高、质量可靠。使用磁珠法全血DNA提取试剂盒纯化的核酸可适用各种常规模操作,包括酶切、PCR文库建立、分子标记、southern杂交试验。 
 
二、磁珠法全血DNA提取试剂盒有什么特点?
1.耗时少:全血DNA提取周期在40分钟左右 
2.操作简便:提取过程无需离心 
3.无毒无害:试剂中不含有氯仿,酚等有毒物质 
4.效果稳定:OD260/OD280均在1.7-2.0之间
5.自动化:可配合国内外各类磁棒式核酸提取仪或核酸提取工作站,实现高通量提取 
 
三、磁珠法全血DNA提取试剂盒的具体操作是什么?
1.裂解   
    取抗凝全血到1.5mLEP管中,加入BufferA、BufferB,混合均匀。然后把EP管置于恒温水箱中温育15~20min。   
2.结合   
    将EP管从温育设备中取出,离心后取上清,加入振荡混匀的磁珠结合液,颠倒混匀。将EP管置于磁力架上进行磁分离,弃废液(吸净管盖及管底残液)。   
3.洗涤   
⑴ 加入洗涤液Ⅰ,点振数次(若有团状或丝状物可增加点振次数及力度),然后磁分离,吸净管盖及管底的残液;   
⑵ 加入洗涤液Ⅱ,点振数次(若有团状或丝状物可增加点振次数及力度),然后磁分离,吸净管盖及管底的残液;   
⑶ 重复步骤⑵一次;   
⑷ 室温下开盖干燥。    
4.洗脱   
    加入洗脱液,放置水浴锅中温育后磁分离,小心吸取上清液至新的EP管中,进行下游实验。 
 
四、磁珠法全血DNA提取试剂盒优势是什么?
(1)生物磁珠具有小尺寸效应和表面效应,能高效提取DNA,满足微量生物样本DNA提取的要求。
(2)磁珠表面能够进行化学修饰,从而与DNA进行特异性吸附,去除样品DNA溶液中的抑制物质,如:有机溶剂、去污剂、金属离子、燃料等。
(3)生物磁珠表面功能团数量可以控制获得可提取DNA溶液的浓度信息,实现定量的要求。
(4)生物磁珠可以通过特殊的合成工艺使其具有超顺磁特性,因此,能够通过仪器进行自动化操作,满足数据库建设对大批量样本提取的需要,减少人为因素。
(5)用时少,操作简单,适用于大多数生物检材。
(6)低廉,便于广泛应用。由于纳米生物磁珠合成采用的都是低价无机和有机原料。无须特殊的仪器设备,使得最终的合成和研发成本都很低,符合我国的基本国情和经济现状。
(7)适应了建立DNA数据库所需的大量生物样本的提取,为我国DNA数据库的建设铺平了道路,打下了基础。
(8)不使用酚、氯仿、异戊醇等有毒试剂,安全无毒,绿色环保。
    与传统提取DNA法相比速度更快!纯度更高!一般情况下不需离心操作,单一样品多应在1h内提取完毕。提取结果均能在凝胶电泳中看到明亮、单一的条带。

五、磁珠法DNA提取试剂盒应用领域是什么?
    DNA提取试剂盒应用于以下领域:分子生物学;医学领域;血站对献血人员的血液筛选;法医学领域;检验检疫领域;农业、林业、畜牧业、海洋生物以及中草药、花卉等领域;生物实验课教学。
磁珠法全血DNA提取试剂盒在国内的形势是什么?
    目前国内外都在投身于磁珠法DNA提取试剂盒的研究与开发,在国内,河南惠尔纳米生物科技有限公司的磁珠法全血DNA提取试剂盒是目前国内外同类产品中稳定性最好,使用最为方便的产品,受到广大科研者的好评。
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